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液相色譜系統的安裝條件以及應注意哪些事項?
雙擊自動滾屏 發布者:鄭州寶晶電子科技有限公司 發布時間:2019/9/23 閱讀:195760

               液相色譜系統的安裝條件以及應注意哪些事項?

[一】儀器安裝條件與注意事項

  1、 安裝本儀器的實驗臺應水平、穩固、并具有足夠的放置空間。避免在具有腐蝕性氣體、大量灰塵或能產生強磁場的地方安裝本儀器,否則將會影響儀器的正常運轉及縮短儀器的使用壽命。

  2、 由于儀器所用溶劑是易燃并且有毒,故安裝設備的房間應通風良好,應具有向外排風的裝置,否則可能引起中毒或身體不適,也可能會引起火災。

  3、 應安裝四個以上三芯電源插座(220V,5~10A),必須具有專門的接地線(注意,絕不能將電源線的中線作為接地線),并確保輸出電源的電壓穩定,否則會導致儀器的不正常運作。如果實驗室無專用接地線,一般可用φ15~20mm的銅棒打入地下1~1.5米,用φ1.2mm 左右的塑膠單股導線連接到電源插座的接地端。

  4、如果實驗室電壓不穩定,應使用穩壓器等必要設備,使電源電壓穩定。

  5、實驗室的室溫應控制在15℃-30℃范圍內,并且波動要??;濕度在45~80%范圍內。

  6、由空調或其他設備產生的氣流不要直吹儀器,避免光線直射及振動。儀器的啟動順序:先開高壓恒流泵和紫外檢測器,待紫外檢測器自檢完畢,回到默認波長254nm后,再開計算機及打開工作站軟件。儀器關閉順序:先按泵停止,關閉氘燈,退出工作站軟件,然后再關儀器。儀器應由專人負責,如果使用人員不固定,請準備《儀器使用登記本》,以明確使用情況,及時處理和保養。

【二】液相色譜系統的日常維護及注意事項

  流動相使用的注意事項必須使用HPLC級或相當于該級別的流動相,并要先經0.45µm薄膜過濾。過濾后的流動相必須經過充分脫氣,以除去其中溶解的氣體(如02),如不脫氣易產生氣泡,增加基線噪聲,造成靈敏度下降,甚至無法分析。

  幾種脫氣方法比較:

  1、 氦氣脫氣法:利用液體中氦氣的溶解度比空氣低,連續吹氦脫氣,效果較好但成本高。

  2、 加熱回流法:效果較好,但操作復雜,且有毒性揮發污染。

  3、 抽真空脫氣法:易抽走有機相

  4、 超聲脫氣法:一種較為常見的脫氣法。流動相放在超聲波容器中,用超聲波震蕩10~15 分鐘,此法效果并不太好但操作簡單。如果管路中使用peek樹脂部件,請不要使用下列流動相:濃硫酸、濃硝酸、二氯乙酸、丙酮、四氫呋喃、二氯甲烷、氯仿和二甲基亞砜

  特別注意HPLC使用過后的系統清洗:含有緩沖鹽溶液的流動相的清洗方法:

  1、 先用100%的純水沖洗,打開排放閥,用3~5ml/min的流量,洗二十分鐘左右后停泵。此舉主要是針對吸液系統、泵頭、進出口單向閥等體積較大的空間的清洗

  2、 再用95:5的甲醇/水清洗整個系統,關閉排放閥,用1ml/min的流量,洗30~60分鐘后停泵。此舉主要是用水清洗整個系統中的鹽,用5%的甲醇主要是為了?;ど字?。

  3、 最后用100%的甲醇清洗整個系統,用1ml/min的流量,洗2分鐘左右,然后關機。如果流動相中不含鹽,則使用上述第三步清洗即可。

【三】液相色譜系統的日常維護及注意事項

  流動相的更換在分析過程中,有時需要更換流動相進行分析。一定要注意前一種使用的流動相和所更換的流動相是不是能夠相溶。如果前一種使用的流動相和所更換的流動相不能夠相溶,那您就要特別注意了。要采用一種與這二種需更換的流動相都能相溶的流動相進行過濾、清洗。較為常用的過濾流動相為異丙醇,但實際操作中要看具體情況而定,原則就是采用與這二種需更換的流動相都能相溶的流動相。一般清洗時間為30~40分鐘,直至系統完全穩定。如不進行以上“特別注意”上述步驟的操作,將會導致系統管路阻塞。嚴重時將引起流通池污染堵塞,不得不更換流通池。用戶就要承擔不必要的損失了。儲液器的注意事項:保持流動相儲液器的清潔是保證儀器正常使用的關鍵。要使用HPLC級的溶劑,對試劑含有緩沖鹽及非HPLC級的流動相一定要用0.45µm過濾器除區去其中的微量物質。

【四】液相色譜系統的日常維護及注意事項

  管路連接的注意事項

  1、 將管子完全插入開口端,直至其與開口端的末端相碰為止。否則將產生死體積,引起峰展寬。

  2、 為了使柱外效應減到最小,獲得理想的分析結果,盡量使用管徑細的管路作為連接。

  3、 管路接頭不要擰得過緊,以防破壞螺紋。

【五】液相色譜系統的日常維護及注意事項

  基本操作注意事項 泵運行前先打開排空閥,用注射器抽出流動相,觀察10秒,流動相應連續流出。不用排空閥時應將其關閉,否則大氣壓力會使流動相從排空閥出口流出。在使用儀器過程中,注意貯液瓶里的流動相是否夠用,如快用盡應及時更換。更換流動相時務必停泵,防止吸入大量空氣,影響儀器正常運作。在啟動分析進樣時,請快速扳動7725i進樣閥,否則會引起系統壓力突跳,影響儀器的使用壽命。如對樣品分析的定性定量要求較高,應配置柱溫箱,保持溫度恒定。若流動相不是純甲醇,樣品分析結束后,必須用HPLC級甲醇對泵及進樣閥進行清洗,大約半小時后,待壓力重新回落并穩定,方可關泵。若流動相中含有緩沖鹽,則須根據其特殊的清洗方法進行清洗(上述提到過)。

【六】液相色譜系統的日常維護及注意事項

  氘燈的保養紫外檢測器中的氘燈是有一定使用壽命的。為了節省燈的使用壽命,在暫時不使用時可在不關機的情況下,只把燈關掉(建議:最好在需要關燈4小時以上才關燈,因為頻繁的開關燈,同樣會縮短燈的使用壽命)。

【七】液相色譜系統的日常維護及注意事項

  色譜柱的保養事項為了?;ど字?,延長其使用壽命,在使用時應采取以下幾方面措施:應在柱頭加燒結片不銹鋼濾片,需要時加?;ぶ?。防止柱頭堵塞,影響分析效果。當流動相的PH>7時,要用大粒度同種填料作預柱。溶劑的化學腐蝕性不能太強。要避免微粒在柱頭沉降。為防止高壓沖擊,泵上的壓力限制不宜太高,一般在15~20MPa為宜,在舊柱或梯度洗脫時應稍高些,以避免因上限設置過低而造成正常使用中的中途?;?。色譜柱長時間不用,存放時,柱內應充滿溶劑(甲醇或乙腈),兩端封死。

【八】液相色譜系統的日常維護及注意事項

  手動進樣閥不的維護注意事項在每次使用后,尤其是進樣濃度差異比較大的樣品時要用專用工具(不是帶針頭的注射器)沖洗進樣閥,沖洗時必須沖洗進樣閥兩頭數次,每次數毫升。以防止無機鹽沉積和樣品微粒造成閥內部磨損或阻塞以及樣品的交叉污染。安裝進樣閥的5,6出口要與注射器在同一水平線上,以防止虹吸現象的發生,導致進樣量的重復性變異。進樣量的多少要根據定量管的環體積決定:當樣品量較少時:進樣體積由注射器的進樣體積決定,但最大體積要小于環體積的1/2。當樣品量較多時:進樣體積由定量管的體積決定,為保證樣品完全把定量管的流動相置換干凈,需注射5-6倍的環體積。要使用專用的液相注射器進樣,絕不可用氣相注射器。注射器前應用專用的樣品過濾器。

九】液相色譜系統的日常維護及注意事項

  高壓恒流泵的維護注意事項泵的密封圈是最易磨損的部件,密封圈的損壞可引起系統的許多故障,要注意保養和定期更換。應采取下列措施以延長使用壽命:絕對不允許在沒有流動相的或流動相還沒有進入泵頭的情況下啟動泵而造成柱塞桿的干磨。每天使用后應將整個系統管路中的緩沖液體沖洗干凈,防止鹽沉積,整個管路要浸在無緩沖的溶液或有機溶劑中。長期不用也要定期開泵沖洗整個管路。要用HPLC級試劑輸液管前端要用燒結不銹鋼沉子過濾流動相。要注意防止管路阻塞造成壓力過高而損壞儀器。壓力下限應設置在0.5~1MPa,以防止儲液器中的流動相被抽干或嚴重滲漏而引起柱塞的干磨有柱后清洗功能的高壓恒流泵還要注意保持清洗液,否則將失去柱后清洗效果。

【十】液相色譜系統的日常維護及注意事項

  泵的壓力不穩定 在安裝調試時以及在日常使用過程中,若出現壓力不穩的現象。

  原因有幾點:(a)、管路里有氣泡,建議由流動相多走些時間?;虼蚩趴輾?,用配件里的針筒多抽幾下。

  (b)、輸入單向閥失效所致,這也是經常遇見的。首先如何判斷輸入單向閥失效。判斷步驟為:如果是雙泵梯度分析系統,故泵壓力不穩必然是其中一臺泵壓力不穩所致,須逐個分析。

  1、 在不開UV檢測器,工作站的前提下,將其中一臺泵接上蒸餾水作為流動相。

  2、 打開排空閥,用針筒抽出些流動相,確認泵中已有該流動相,然后將針筒內的液體排出,并重新接在排空閥上。

  3、 按“設置”鍵直至出現“沖洗”字樣,選擇是,并啟動沖洗功能。流量5ml/min時間5min (注意:此時排空閥仍要打開,否則將沖壞色譜柱)

  4、 沖洗完畢后。查看針筒內流動相體積是否為20ml(5×5=25),若正確,則說明該泵在低壓情況下無故障;若不正確,則說明該泵中某一單向閥失效(一般為輸入單向閥)。

  5、 用同樣的方法測試另外一泵。等度只要測試一臺就可以了。造成單向閥失效的原因有幾點: ①液相色譜從成品到客戶手中有一段時間,出廠前每臺儀器都要經過調試,一段時間內不會造成內部殘留流動相與寶石球粘連的情況??突Сて誆揮靡不嵩斐衫嗨魄榭?,建議客戶在長期不使用情況下,每周用甲醇作為流動相,開機1小時使管路充滿液體。 ②流動相內雜質或其它原因污染了單向閥。雖然有的客戶認為流動相已過濾了。但長期使用后,由于液相色譜是微量分析儀器,難免會產生類似情況。這是液相色譜的普遍現象,國內外的泵只要是被動單向閥,都會有類似現象發生,這并不是儀器的質量問題。而是日常維護的一部分。現在介紹一個簡單而有效的單向閥失效的處理辦法。

  單向閥失效處理辦法: ①擰下2個單向閥(一個為進口,另一個為出口) ②將2個單向閥擰上清洗用四氟特殊螺帽(在儀器附件中),放入超聲波清洗器,先用異丙醇清洗10分鐘,再用清水清洗10分鐘,擰上四氟特殊螺帽主要是防止清洗時單向閥被散開。 ③完畢后,將2個單向閥裝回原位即可。(注意單向閥必須擰緊)若兩個泵在低壓狀態下流量都正確,則建議分別將兩泵連接上色譜柱進行高壓測試。

  高壓測試具體 操作方法: ①在雙泵分析系統連接的前提下,只須先打開其中一泵(確認接好流動相) ②設置流量1ml/min ③啟動泵 ④觀察運行期間,泵的壓力是否穩定。若穩定,說明泵無問題;若泵壓力不穩,則應檢查各管路接頭有無泄露,并將有泄露的接頭擰緊:若無泄露,則問題可能還是出在單向閥上,須再次沖單向閥,反復實驗。(注:不必打開UV檢測器及工作站) ⑤重復上述步驟,對另一臺泵進行高壓測試如還出現壓力不穩的情況,有可能密封圈受損,建議更換。

【十一】液相色譜系統的日常維護及注意事項

  紫外檢測器的維護注意事項要保持檢測器中的流通池清潔,每天用后注意沖洗真整個管路。要定期用強溶劑反向沖洗流通池(斷開柱),以清洗流通池。流動相要脫氣,防止氣泡滯留在流通池內,影響分析效果。注意氘燈的保養,及時更換。
 
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